药靶细胞株建立

在细胞系中表达的药物靶蛋白也常用于筛选苗头分子。当靶蛋白很难纯化并且必须存在于细胞中时就需要用细胞系表达药靶蛋白并且用细胞系进行筛选,例如细胞质膜蛋白。这种药物靶蛋白整个信号通路其中一部分。另外,在以蛋白质为靶蛋白第一轮筛选确定苗头分子后,需要用细胞进行第二次功能分析。

表达特定蛋白质的细胞系通常是通过细胞的转染来完成的,质粒构建物上克隆目标蛋白的cDNA并准备在宿主细胞中表达。当目标蛋白是细胞的一部分,并且可以传到许多代细胞时,细胞系通常也被称为“稳定的”。这是因为编码靶蛋白的DNA被整合到宿主的基因组DNA中。

最常用的宿主细胞系是

  • CHO细胞
  • HEK293细胞

宿主细胞上常见表达的靶蛋白的例子有

  • 离子通道
  • G蛋白偶联受体(GPCRs)
  • 细胞内受体

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